物质吸收由光源发出的某些波长的光可形成吸收光谱，由于物质的分子结构不同，对光的吸收能力不同，因此每种物质都有特定的吸收光谱，而且在一定条件下其吸收程度与该物质的浓度成正比，分光光度法是利用物质的这种吸收特征对不同物质进行定性或定量分析的方法。
 　　使用前仪器要调零、调百校准，参比溶液又称空白溶液。测量时用作比较的、不含被测物质但其基体尽可能与试样溶液相似的溶液。通常，用参比溶液扫描的曲线应是一条平坦的直线。有时，基体中虽不含被测物质，但含有别的物质，这时必须保证其不影响测试。经常碰到的是试剂空白中含有被测物质，此时必须经过纯化将其除去。否则将影响测定结果。在色谱分析中，有时基体中可能存在一个以上的和被测组分相距较远的色谱峰，计算机在数据处理中不会计入它们，不影响测定。
 　　以所含铁离子是多少为例：
 　　参比溶液与测量溶液则相差铁离子含量，在测量之前要用不含铁离子的参比溶液扫描，调整仪器后(调100的过程)，然后再测量含铁离子溶液的比色皿，这样测量溶液中的铁离子会形成自己特定的峰值，次峰值与数据库里基准峰值对比会得出溶液所含量了。如果数据库中没有铁离子的曲线，你还要自己先用不同铁离子浓度的溶液做工作曲线，然后进行测量。
 　　1、机器开关在机器的右侧，按一下会打开，有个小的屏幕，可以按数字键来操作选项，测吸光值操作。
 　　2、按数字键1，进入选项，有当前参数、吸光度等。
 　　3、点击键盘上的GOTO键去设置，一般设置为600，输入直接按数字键则可以。输入之后按ENTER这个键，这个是确认键。
 　　4、把样品放到比色皿里面，留一个比色皿方蒸馏水，将蒸馏水的比色皿放到第yi个其余的依次放入。
 　　5、盖上一起的盖子，拉环的位置正处于测定第yi个比色皿的位置，这一步需要归零，按键盘上的ZREO键。
 　　6、归零之后，开始依次用力拖动把手，显示屏上会显示出对应的吸光度，依次纪录数值，则能完成测定吸光值的实验。